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Dopo il clamoroso e meritatissimo successo ottenuto con il secondo capitolo della saga, Ubisoft pensò bene di battere il ferro finché fosse caldo ed è così che l'anno successivo nacque Brotherhood, vale a dire il secondo episodio dedicato alle gesta del carismatico Ezio Auditore da Firenze. Il gioco è ambientato in una spettacolare Roma rinascimentale e riprende la trama laddove era stata bruscamente interrotta. Presenta inoltre la novità di poter gestire un'intera fratellanza di Assassini pronti a darci man forte ed introduce una modalità multiplayer online che sarà poi riproposta negli episodi successivi.